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MedWire Notizie: I ricercatori hanno identificato l'obiettivo principale degli autoanticorpi trovati nel siero di pazienti con il disturbo vescicale della pelle pemphigus vulgaris (PV).

I pazienti PV sviluppano anticorpi contro le proteine ​​desmoglein (DSG) 1 e 3, che aiutano le cellule epidermiche ad aderire e mantengono l'integrità della pelle, causando dolorose vesciche sulla pelle e sulle membrane mucose.

Giovanna Zambruno (Istituto Dermopatico dell'Immacolata, Roma, Italia) e colleghi hanno scoperto che l'interfaccia cis-adesiva del dominio extracellulare DSG3 (EC) 1 è l'obiettivo principale dell'anticorpo PV (A) 224 generato nel siero di pazienti con PV.

Terapie esistenti per la condizione colpiscono l'intero sistema immunitario, ma questo può causare problemi con gli effetti collaterali e può portare a pazienti che sono vulnerabili alle infezioni.

Per individuare in modo più specifico il trigger della produzione di autoanticorpi in PV, Zambruno e gli anticorpi di immunoglobulina 15 isolati (Ig) G isolati dal team specifici per DSG3 da due pazienti con il disturbo.

Di questi, tre strati interrotti di cellule della pelle in laboratorio e due erano patogeni quando espressi in un modello di trasferimento passivo murino.

Gli epitopi riconosciuti dagli anticorpi PV patogeni sono stati isolati ai sottodomini DSG3 EC1 ed EC2 e uno specifico test sierologico è stato utilizzato per individuare il target del PVA224 come interfaccia cis-adesivo su EC1.

I ricercatori suggeriscono che l'autoreattività osservata nel PV è dovuta a mutazioni somatiche che sono generate da un antigene diverso da DSG3, poiché il legame con DSG3 è scomparso quando le mutazioni somatiche sono ritornate alla sequenza germinale.

"L'identificazione di una regione immunodominante bersaglio di anticorpi patogeni ha implicazioni per la diagnosi di PV e apre nuove prospettive verso la definizione di approcci terapeutici per il trattamento di pazienti PV", scrivono Zambruno e team nel Journal of Clinical Investigation.

"Infine, la versione germinata degli autoanticorpi PV può portare all'identificazione degli antigeni che alla fine portano allo sviluppo di questa malattia potenzialmente letale."

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Il Pemphigus vulgaris (PV) è una malattia vescicale autoimmune della pelle e delle mucose causata da autoanticorpi alle proteine ​​della famiglia desmoglein (DSG) DSG3 e DSG1, che portano alla perdita di adesione delle cellule dei cheratinociti. Per saperne di più sugli autoanticorpi PV patogeni, abbiamo isolato anticorpi IgG 15 specifici per DSG3 da pazienti 2 PV. Tre anticorpi hanno distrutto i monostrati dei cheratinociti in vitro e 2 era patogeno in un modello di trasferimento passivo nei topi neonatali. Gli epitopi riconosciuti dagli anticorpi patogeni sono stati mappati ai sottodomini extracellulari 3 (EC1) e EC1 di DSG2, regioni coinvolte nelle interazioni cis-adesivo. Utilizzando un test sierologico specifico del sito, abbiamo scoperto che l'interfaccia cis-adesivo su EC1 riconosciuta dall'antigene patogeno PVA224 è l'obiettivo primario degli autoanticorpi presenti nel siero di pazienti PV. Gli autoanticorpi isolati utilizzavano geni della regione variabile della catena pesante e della catena leggera e trasportavano alti livelli di mutazioni somatiche in regioni di determinazione complementare, coerenti con la selezione antigenica. Sorprendentemente, il legame con DSG3 è stato perso quando mutazioni somatiche sono state riportate alla sequenza germinale. Questi risultati identificano l'interfaccia cis-adesiva di DSG3 come regione immunodominante bersaglio di anticorpi patogeni nel PV e indicano che l'autoreattività si basa su mutazioni somatiche generate nella risposta ad un antigene non correlato a DSG3.

Il Pemphigus vulgaris (PV) è una malattia vescica autoimmune pericolosa per la vita della pelle e delle mucose causata da autoanticorpi che si legano alle molecole di adesione cellula-cellula tipo caderina desmoglein 3 (DSG3) e DSG1, i principali costituenti dei desmosomi e causano la perdita di adesione delle cellule dei cheratinociti. Il ruolo fondamentale degli autoanticorpi nella patogenesi del fotovoltaico è supportato dalle osservazioni che l'attività della malattia si correla con i titoli anticorpali anti-DSG3, che i neonati di madri con PV attivo presentano vesciche causate dal trasferimento placentare di anticorpi materni e che le lesioni simili al pemfigo sono indotta in topi neonatali mediante trasferimento passivo di IgG anti-DSG3 da pazienti PV.

Nella pelle, DSG3 è principalmente espresso negli strati basali e soprabasali, mentre il DSG1 è prevalentemente espresso negli strati epidermici superiori. Al contrario, negli epiteli stratificati non cornificati, come la mucosa orale, il DSG3 è altamente espresso in tutto l'epitelio, mentre il DSG1 è espresso ad un livello molto più basso. Il pattern di espressione differenziale di DSG1 e DSG3 è responsabile delle varianti cliniche del pemfigo: gli anticorpi a DSG3 sono presenti nella forma mucosa, mentre gli anticorpi a DSG3 e DSG1 sono associati a lesioni mucocutanee.

DSG3 è una glicoproteina di membrana legante il calcio con un dominio extracellulare comprendente sottodomini 5 distinti (EC1-EC5) ed è sintetizzata come proproteina, che viene processata nell'apparato di Golgi mediante rimozione di un propeptide prima di trasportarla sulla superficie cellulare. La scissione del propeptide avviene a monte di un residuo di triptofano conservato nel sottodominio EC1, residui di smascheramento critici per la formazione di interazioni omofiliche con DSG3 su cellule opposte. Diversi studi hanno dimostrato che gli anticorpi policlonali nel siero FV reagiscono principalmente con l'amminoterminus di DSG3 nei sottodomini EC1 ed EC2 (aminoacidi 1-161).

L'isolamento di mAbs patogeni è strumentale per rispondere a domande sul meccanismo che induce la risposta autoreattiva e guida la formazione di bolle nei pazienti PV. Amagai e colleghi isolati da un modello di topo attivo di PV un anticorpo patogeno, AK23, che causa la perdita di adesione cellulare legandosi al sottodominio EC1 di DSG3 che è coinvolto nella formazione dell'interfaccia trans-adesiva. Un numero di mAbs patogeni e non patogeni anti-DSG umani sono stati isolati come frammenti a regione variabile a catena singola (scFvs) da un paziente PV. Analogamente al mAb di AK23, l'attività patogena di questi anticorpi umani è stata mappata alla regione aminoterminale di EC1, che è mascherata dal propeptide. Presi insieme, i dati umani e del topo suggeriscono che gli anticorpi patogeni si legano principalmente all'EC1 e interrompono l'adesione dei cheratinociti interferendo con l'interfaccia trans-adesiva di DSG3.

In questo studio, abbiamo isolato da 2 PV pazienti diversi autoanticorpi IgG che legano DSG3. Questi anticorpi trasportavano alti livelli di mutazioni somatiche che erano necessari per legarsi a DSG3. Gli epitopi riconosciuti dagli anticorpi patogeni 3 sono stati mappati ai sottodomini EC1 ed EC2 in regioni che dovrebbero essere coinvolte nelle interazioni cis-adesivo. Questa regione è risultata l'obiettivo primario degli autoanticorpi sierici nei pazienti PV. Questi risultati identificano l'interfaccia cis-adesivo come la regione immunodominante bersaglio di anticorpi patogeni nel PV e suggeriscono che l'autoreattività si basa su mutazioni somatiche innescate da un antigene non correlato.

Articolo completo Disponibile a: http://www.jci.org/articles/view/64413