Marcatori archivi: autoanticorpi

IMPORTANZA Una rara variante del pemfigoide della membrana mucosa (MMP) è caratterizzata da autoanticorpi anti-laminina 332 (Lam332) circolanti e sembra essere associata a neoplasie maligne concomitanti.

OBBIETTIVO Per determinare la prevalenza e il significato clinico del rilevamento di anticorpi anti-Lam332 da una vasta serie di pazienti con MMP. DESIGN Studio retrospettivo multicentrico.

IMPOSTAZIONE Quattro centri nazionali francesi per malattie bollose autoimmuni.

PARTECIPANTI Sono stati inclusi centocinquantaquattro pazienti con MMP e 89 che fungono da controlli.

INTERVENTI I campioni di siero sono stati analizzati con un nuovo saggio di immunoassorbimento legato all'enzima Lam332 (ELISA); dati clinici e immunopatologici sono stati ottenuti dalle cartelle cliniche dei pazienti.

PRINCIPALI MISURE DI RISULTATO I punteggi ELISA di Lam332 sono stati valutati rispetto alle caratteristiche cliniche, all'immunofluorescenza indiretta standard e salt split, e ai bollini pemfigoidi (BP) 230 e BP180-NC16A bolloso.

RISULTATI Il punteggio ELISA di Lam332 era positivo (≥9 U / mL) in 20.1% di campioni di siero da pazienti con MMP, 1 di 50 pazienti con pemfigoide bolloso (BP), nessuno di 7 con pemfigo e 3 di 32 altri controlli. Non è stata evidenziata alcuna relazione tra un punteggio ELISA positivo per Lam332 e l'età; rapporto sessuale; coinvolgimento orale, oculare, genitale, cutaneo o esofageo / laringeo; neoplasma maligno interno; o punteggio ELISA BP180. I risultati ottenuti con immunofluorescenza indiretta della cute salt-split e con ELISA BP230 erano più frequentemente positivi quando i risultati di ELISA di Lam332 erano positivi (rispettivamente P = .04 e .02). I pazienti con un punteggio ELISA positivo per Lam332 presentavano frequentemente MMP più severa (67.8% vs 47.2%; P = .04).

CONCLUSIONI E PERTINENZA I risultati di questo romanzo ELISA hanno mostrato che gli autoanticorpi anti-Lam332 sierici sono rilevati in 20.1% di pazienti con MMP. Gli autoanticorpi anti-Lam332 sono principalmente rilevati in pazienti con MMP severo ma non preferenzialmente in quelli con neoplasia maligna. L'associazione tra autoanticorpi anti-Lam332 e anti-BP230 potrebbe derivare da un fenomeno di diffusione di un epitopo.

Dermatologia JAMA (Chicago, Illinois)

Il pemfigoide bolloso è una malattia della vescica autoimmune caratterizzata dalla presenza di autoanticorpi circolanti che riconoscono le proteine ​​specifiche dell'epidermide e la giunzione dermoepidermica. La diagnosi si basa su criteri clinici e indagini di laboratorio, in particolare istologia, immunofluorescenza diretta e indiretta ed ELISA. Questo studio descrive un nuovo test di immunofluorescenza per la determinazione parallela di anti-BP180 e anti-BP230 a base di substrati antigenici ricombinanti. Lo scopo dello studio era di rilevare gli autoanticorpi BP180 e BP230 mediante la tecnologia BIOCHIP utilizzando sia una proteina ricombinante appositamente progettata BP180-NC16A che cellule che esprimono il frammento dell'antigene BP230-gc. I pazienti 18 con pemfigoide bolloso sono stati inclusi nello studio. Autoanticorpi verso BP180 sono stati rilevati con la tecnica BIOCHIP in 83.33% di pazienti con pemfigoide bolloso clinico, sierologico e immunoistologico confermato mentre gli autoanticorpi contro BP230-gC sono stati rilevati solo nel 39% dei pazienti. L'individuazione di anti-BP180-NC16A e anti-BP230-gC mediante un nuovo immunodosaggio basato su biochip è un'alternativa adatta all'immunofluorescenza indiretta e all'ELISA. Questo metodo ha il vantaggio di discriminare facilmente le diverse specificità degli autoanticorpi. Il metodo BIOCHIP è più veloce, più economico e facile da usare rispetto all'approccio ELISA. Per questo motivo, il nuovo metodo potrebbe essere utilizzato come test di screening iniziale per identificare i pazienti con pemfigoide bolloso, e i risultati dubbi potrebbero quindi essere confermati dall'ELISA.

Articolo completo (gratuito) trovato qui: http://www.hindawi.com/isrn/dermatology/2012/237802/

La sindrome di Senear-Usher o il pemfigo eritematoso è una patologia che si sovrappone clinicamente e sierologicamente con il pemfigo foliaceo e il lupus eritematoso. Le biopsie cutanee di pazienti con pemfigo eritematoso rivelano acantolisi e depositi di immunoglobuline nei desmosomi e sono positive nel test della banda del lupus. Nel presente lavoro, abbiamo determinato se gli autoanticorpi associati al pemfigo eritematoso hanno come bersaglio un singolo antigene o antigeni multipli a seguito della stimolazione di cloni di cellule B indipendenti. Il nostro presente documento dimostra che i pazienti con pemfigo eritematoso producono entrambi anticorpi antiepiteliali specifici per desmogleina 1 e 3 e anticorpi antinucleari specifici per antigeni del DNA Ro, La, Sm e a doppio filamento. Dopo aver eluito specifici anticorpi anti-epiteliali o anti-nucleari, che sono stati recuperati e testati utilizzando saggi a doppia fluorescenza, è stata dimostrata una mancanza di cross-reattività tra i desmosomi e gli antigeni del lupus nucleare e citoplasmatico. Questo risultato suggerisce che gli autoanticorpi in pemfigo eritematoso sono diretti contro diversi antigeni e che questi autoanticorpi sono prodotti da cloni indipendenti. Dati questi dati clinici e sierologici, suggeriamo che il pemfigo eritematoso si comporta come una malattia autoimmune multipla.

L'articolo completo può essere visualizzato su: http://www.hindawi.com/journals/ad/2012/296214/

La base molecolare dell'eterogeneità della malattia in condizioni autoimmuni come il pemfigo vulgaris è poco conosciuta. Sebbene desmoglein 3 (Dsg3) sia stato ben definito come obiettivo primario degli autoanticorpi di immunoglobuline (Ig) nel PV, rimangono alcune domande riguardanti la distribuzione complessiva dei sottotipi Igsg3 Ig tra i sottogruppi di pazienti e una considerevole controversia sul fatto che un interruttore isotipico possa essere osservato tra le fasi dell'attività della malattia. Per affrontare sistematicamente le questioni in sospeso relative alla specificità di Ig-isotipo in PV, abbiamo analizzato i livelli di IgA, IgM, IgG1, 2, 3 e 4 anti-Dsg3 mediante ELISA in campioni di siero 202 ottenuti da pazienti 92 con distinti profili clinici basati su un set di parametri clinici definiti variabili (attività, morfologia, età, durata) e costanti (tipo HLA, genere, età di insorgenza) e campioni di siero 47 da controlli abbinati e abbinati a HLA. I nostri risultati forniscono supporto per studi precedenti che identificano IgG4 e IgG1 come gli anticorpi predominanti nel PV con livelli significativamente più alti nei pazienti attivi rispetto a quelli remittenti. Non vediamo evidenze per un passaggio isotipico tra fasi dell'attività della malattia e remissione, ed entrambi i sottotipi di IgG4 e IgG1 rimangono elevati nei pazienti remoti rispetto ai controlli. Tuttavia, riteniamo che l'IgG4 sia l'unico sottotipo che distingue ulteriormente i sottogruppi di pazienti PV basati su diverse morfologie della malattia, durata della malattia e tipi di HLA. Questi dati forniscono ulteriori informazioni sui meccanismi immunitari responsabili dell'espressione fenotipica della malattia e contribuiscono allo sforzo più ampio di stabilire immunoprofili completi alla base dell'eterogeneità della malattia per facilitare interventi terapeutici sempre più specifici e individualizzati.

Articolo completo disponibile a: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/22779708

MedWire Notizie: I ricercatori hanno identificato l'obiettivo principale degli autoanticorpi trovati nel siero di pazienti con il disturbo vescicale della pelle pemphigus vulgaris (PV).

I pazienti PV sviluppano anticorpi contro le proteine ​​desmoglein (DSG) 1 e 3, che aiutano le cellule epidermiche ad aderire e mantengono l'integrità della pelle, causando dolorose vesciche sulla pelle e sulle membrane mucose.

Giovanna Zambruno (Istituto Dermopatico dell'Immacolata, Roma, Italia) e colleghi hanno scoperto che l'interfaccia cis-adesiva del dominio extracellulare DSG3 (EC) 1 è l'obiettivo principale dell'anticorpo PV (A) 224 generato nel siero di pazienti con PV.

Terapie esistenti per la condizione colpiscono l'intero sistema immunitario, ma questo può causare problemi con gli effetti collaterali e può portare a pazienti che sono vulnerabili alle infezioni.

Per individuare in modo più specifico il trigger della produzione di autoanticorpi in PV, Zambruno e gli anticorpi di immunoglobulina 15 isolati (Ig) G isolati dal team specifici per DSG3 da due pazienti con il disturbo.

Di questi, tre strati interrotti di cellule della pelle in laboratorio e due erano patogeni quando espressi in un modello di trasferimento passivo murino.

Gli epitopi riconosciuti dagli anticorpi PV patogeni sono stati isolati ai sottodomini DSG3 EC1 ed EC2 e uno specifico test sierologico è stato utilizzato per individuare il target del PVA224 come interfaccia cis-adesivo su EC1.

I ricercatori suggeriscono che l'autoreattività osservata nel PV è dovuta a mutazioni somatiche che sono generate da un antigene diverso da DSG3, poiché il legame con DSG3 è scomparso quando le mutazioni somatiche sono ritornate alla sequenza germinale.

"L'identificazione di una regione immunodominante bersaglio di anticorpi patogeni ha implicazioni per la diagnosi di PV e apre nuove prospettive verso la definizione di approcci terapeutici per il trattamento di pazienti PV", scrivono Zambruno e team nel Journal of Clinical Investigation.

"Infine, la versione germinata degli autoanticorpi PV può portare all'identificazione degli antigeni che alla fine portano allo sviluppo di questa malattia potenzialmente letale."

medwireNews (www.medwire-news.md) è un servizio indipendente di notizie cliniche fornito da Springer Healthcare Limited. © Springer Healthcare Ltd; 2012

Leggi a: http://www.medwire-news.md/66/101414/Dermatology/Therapeutic_targets_for_pemphigus_vulgaris_discovered.html

sfondo Pemphigus vulgaris (PV) e pemphigus foliaceus (PF) sono patologie potenzialmente letali di vesciche causate da autoanticorpi diretti contro le proteine ​​di adesione desmoglein (Dsg). Studi precedenti hanno mostrato una predominanza di IgG4> IgG1 di anticorpi anti-Dsg nel pemfigo; tuttavia, nessuno studio ha esaminato i livelli sierici di IgG4 nel pemfigo. IgG4 è indotto dalla stimolazione cronica dell'antigene, che potrebbe verificarsi con vesciche persistenti della cute e potenzialmente elevare il siero totale di IgG4 rispetto ad altre sottoclassi di IgG in pazienti con pemfigo.

obiettivi L'obiettivo principale dello studio era di quantificare sottoclassi IgG totali e Dsg-specifiche in pazienti con pemfigo.

metodi Sottoclassi di IgG e IgG1 e IgG4 specifici per Dsg sono stati quantificati in pazienti con PV e PF e in sieri da controlli di età corrispondente usando un saggio di immunoassorbimento legato ad enzima di sottoclasse. L'efficacia della deplezione di IgG4 nel bloccare la patogenicità delle IgG nel PV è stata determinata utilizzando un saggio di dissociazione dei cheratinociti.

risultati Gli anticorpi specifici per Dsg comprendevano una mediana di 7 · 1% e 4 · 2% di IgG4 totale in pazienti con PV e PF, rispettivamente, con un arricchimento di otto volte e quattro volte in IgG4 vs IgG1. Il siero totale IgG4, ma non altre sottoclassi di IgG, è stato arricchito in pazienti con PV e PF rispetto ai controlli corrispondenti per età (P = 0 · 004 e P = 0 · 005, rispettivamente). La deplezione di IgG4 di sieri di PV ha ridotto la patogenicità in un saggio di dissociazione dei cheratinociti e ha dimostrato che IgG4 purificato per affinità è più patogeno di altre frazioni di IgG sieriche.

conclusioni Gli autoanticorpi specifici al Dsg sono significativamente arricchiti in IgG4, il che può spiegare l'arricchimento del siero totale IgG4 in alcuni pazienti con pemfigo. Preferendo gli autoimmuni piuttosto che gli anticorpi immunitari benefici, le terapie mirate con IgG4 possono offrire opzioni di trattamento più sicure per il pemfigo.

Articolo completo disponibile a: http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/j.1365-2133.2012.11144.x/abstract

Il Pemphigus vulgaris (PV) è una malattia vescicale autoimmune della pelle e delle mucose causata da autoanticorpi alle proteine ​​della famiglia desmoglein (DSG) DSG3 e DSG1, che portano alla perdita di adesione delle cellule dei cheratinociti. Per saperne di più sugli autoanticorpi PV patogeni, abbiamo isolato anticorpi IgG 15 specifici per DSG3 da pazienti 2 PV. Tre anticorpi hanno distrutto i monostrati dei cheratinociti in vitro e 2 era patogeno in un modello di trasferimento passivo nei topi neonatali. Gli epitopi riconosciuti dagli anticorpi patogeni sono stati mappati ai sottodomini extracellulari 3 (EC1) e EC1 di DSG2, regioni coinvolte nelle interazioni cis-adesivo. Utilizzando un test sierologico specifico del sito, abbiamo scoperto che l'interfaccia cis-adesivo su EC1 riconosciuta dall'antigene patogeno PVA224 è l'obiettivo primario degli autoanticorpi presenti nel siero di pazienti PV. Gli autoanticorpi isolati utilizzavano geni della regione variabile della catena pesante e della catena leggera e trasportavano alti livelli di mutazioni somatiche in regioni di determinazione complementare, coerenti con la selezione antigenica. Sorprendentemente, il legame con DSG3 è stato perso quando mutazioni somatiche sono state riportate alla sequenza germinale. Questi risultati identificano l'interfaccia cis-adesiva di DSG3 come regione immunodominante bersaglio di anticorpi patogeni nel PV e indicano che l'autoreattività si basa su mutazioni somatiche generate nella risposta ad un antigene non correlato a DSG3.

Il Pemphigus vulgaris (PV) è una malattia vescica autoimmune pericolosa per la vita della pelle e delle mucose causata da autoanticorpi che si legano alle molecole di adesione cellula-cellula tipo caderina desmoglein 3 (DSG3) e DSG1, i principali costituenti dei desmosomi e causano la perdita di adesione delle cellule dei cheratinociti. Il ruolo fondamentale degli autoanticorpi nella patogenesi del fotovoltaico è supportato dalle osservazioni che l'attività della malattia si correla con i titoli anticorpali anti-DSG3, che i neonati di madri con PV attivo presentano vesciche causate dal trasferimento placentare di anticorpi materni e che le lesioni simili al pemfigo sono indotta in topi neonatali mediante trasferimento passivo di IgG anti-DSG3 da pazienti PV.

Nella pelle, DSG3 è principalmente espresso negli strati basali e soprabasali, mentre il DSG1 è prevalentemente espresso negli strati epidermici superiori. Al contrario, negli epiteli stratificati non cornificati, come la mucosa orale, il DSG3 è altamente espresso in tutto l'epitelio, mentre il DSG1 è espresso ad un livello molto più basso. Il pattern di espressione differenziale di DSG1 e DSG3 è responsabile delle varianti cliniche del pemfigo: gli anticorpi a DSG3 sono presenti nella forma mucosa, mentre gli anticorpi a DSG3 e DSG1 sono associati a lesioni mucocutanee.

DSG3 è una glicoproteina di membrana legante il calcio con un dominio extracellulare comprendente sottodomini 5 distinti (EC1-EC5) ed è sintetizzata come proproteina, che viene processata nell'apparato di Golgi mediante rimozione di un propeptide prima di trasportarla sulla superficie cellulare. La scissione del propeptide avviene a monte di un residuo di triptofano conservato nel sottodominio EC1, residui di smascheramento critici per la formazione di interazioni omofiliche con DSG3 su cellule opposte. Diversi studi hanno dimostrato che gli anticorpi policlonali nel siero FV reagiscono principalmente con l'amminoterminus di DSG3 nei sottodomini EC1 ed EC2 (aminoacidi 1-161).

L'isolamento di mAbs patogeni è strumentale per rispondere a domande sul meccanismo che induce la risposta autoreattiva e guida la formazione di bolle nei pazienti PV. Amagai e colleghi isolati da un modello di topo attivo di PV un anticorpo patogeno, AK23, che causa la perdita di adesione cellulare legandosi al sottodominio EC1 di DSG3 che è coinvolto nella formazione dell'interfaccia trans-adesiva. Un numero di mAbs patogeni e non patogeni anti-DSG umani sono stati isolati come frammenti a regione variabile a catena singola (scFvs) da un paziente PV. Analogamente al mAb di AK23, l'attività patogena di questi anticorpi umani è stata mappata alla regione aminoterminale di EC1, che è mascherata dal propeptide. Presi insieme, i dati umani e del topo suggeriscono che gli anticorpi patogeni si legano principalmente all'EC1 e interrompono l'adesione dei cheratinociti interferendo con l'interfaccia trans-adesiva di DSG3.

In questo studio, abbiamo isolato da 2 PV pazienti diversi autoanticorpi IgG che legano DSG3. Questi anticorpi trasportavano alti livelli di mutazioni somatiche che erano necessari per legarsi a DSG3. Gli epitopi riconosciuti dagli anticorpi patogeni 3 sono stati mappati ai sottodomini EC1 ed EC2 in regioni che dovrebbero essere coinvolte nelle interazioni cis-adesivo. Questa regione è risultata l'obiettivo primario degli autoanticorpi sierici nei pazienti PV. Questi risultati identificano l'interfaccia cis-adesivo come la regione immunodominante bersaglio di anticorpi patogeni nel PV e suggeriscono che l'autoreattività si basa su mutazioni somatiche innescate da un antigene non correlato.

Articolo completo Disponibile a: http://www.jci.org/articles/view/64413

MADAM, Autoanticorpi in pemphigus target preferenzialmente desmoglein 1 (Dsg1) e Dsg3, e raramente desmocollins 1-3 (Dsc1-3). Pemphigus herpetiformis (PH) è uno dei sottotipi di pemfigo e caratterizzato da eritemi anulari pruriginosi con vescicole nella periferia, rarità di coinvolgimento della mucosa e cambiamento istopatologico della spongiosi eosinofila. Recentemente, gli autoanticorpi IgG anti-Dsc3 sono stati suggeriti per causare lesioni cutanee in un caso di pemfigo volgare. In questo studio, riportiamo il primo caso di concomitante pemfigoide bolloso (BP) e PH con anticorpi IgG anti Dsgs e Dscs.

a partire dal: http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/bjd.12019/abstract

Leggiamo con interesse lo studio di Koga H et al1 e crediamo che alla luce delle recenti osservazioni che includono i nostri dati (Tabella 1) la "teoria della compensazione del desmoglein" come spiegazione per la localizzazione dei blister dovrebbe essere rivisitata 2,3,4. Sebbene la rottura dell'adesione cellulare desmoglein-dipendente da autoanticorpi sia la patofisiologia di base alla base della formazione di bolle in pemfigo 2-4, lo spettro clinico non rispecchia sempre questo processo patogeno. Sono stati descritti tre tipi clinici di pemfigo, il tipo mucosale dominante, cutaneo e mucocutaneo 2 ,, 3,4 .
http://onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1111/bjd.12012/abstract

Il pemfigoide bolloso (BP) è una malattia della pelle vescica autoimmune. Gli autoanticorpi contro BP180 e BP230 possono essere rilevati mediante immunofluorescenza indiretta (IIF) su diversi substrati (esofago, pelle scissa da sali, punti antigene BP180, cellule trasfettate con BP230) ed ELISA. Qui, abbiamo confrontato le caratteristiche del test di questi sistemi di test. Abbiamo analizzato i sieri da pazienti con BP (n = 60) nei quali la diagnosi clinica era stata confermata istopatologicamente. La coorte di controllo comprendeva sieri di pazienti con altre malattie della pelle associate ad autoimmune (n = 22) o infiammatorie (n = 35). Tutti i campioni sono stati testati da IIF (EUROIMMUN ™ Dermatology Mosaic) ed ELISA (EUROIMMUN e MBL). Anti-BP180 è meglio rilevato con i punti antigene BP180 di IIF (sensibilità: 88%; specificità: 97%). Rispetto alla IIF, le differenze con entrambe le tecniche ELISA BP180 sono piccole. I rapporti di verosimiglianza (LR) per i risultati dei test positivi e negativi sono> 10 e tra 0.1 e 0.2, rispettivamente, per tutti i sistemi di test. Il rilevamento di anti-BP230 è altamente variabile (intervallo di sensibilità 38-60%; intervallo di specificità 83-98%). Solo il test IIF rivela una LR per risultati positivi del test> 10. Poiché le LR per un test negativo sono tutte ~ 0.5, i risultati negativi dei test per gli anticorpi anti-BP230 non aiutano a escludere la BP. In conclusione, il test multi-parametro IIF rivela una buona prestazione diagnostica in BP. Poiché questo test consente simultaneamente il rilevamento di anticorpi anti-Dsg1 e anti-Dsg3, coinvolti in pemfigo foliaceo e vulgaris, una singola incubazione di test può essere sufficiente per differenziare tra le più frequenti malattie vescicolari autoimmuni.

In conclusione, il test multi-parametro IIF rivela una buona prestazione diagnostica in BP. Poiché questo test consente simultaneamente il rilevamento di anticorpi anti-Dsg1 e anti-Dsg3, coinvolti in pemfigo foliaceo e vulgaris, una singola incubazione di test può essere sufficiente per differenziare tra le più frequenti malattie vescicolari autoimmuni. PMID: 22580378 [PubMed - in process] (Fonte: Journal of Immunological Methods)
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